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关于临床血脂测定的建议
发布日期:2012年01月02日  【加入收藏

前  言

 

血脂分析不仅对动脉粥样硬化(AS)、冠心病的防治具有重要意义,而且已经应用于其它诸多临床相关专业疾病的研究,如糖尿病、肾病以及绝经期后妇女内分泌代谢改变等。中华医学会检验分会于1995年分别就血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的测定提出了推荐方法,卫生部北京老年医学研究所起草的中华人民共和国卫生行业标准“血清总胆固醇的酶法测定”(WS/T 120-1999)和“血清载脂蛋白AI及载脂蛋白B免疫透射比浊测定法”(WS/T 121-1999),对于临床实验室提高血脂分析水平起到了积极推动作用,但在实际应用工作中仍有许多问题亟待进一步解决。如对TG的两步酶法测定有些不同意见;用沉淀法测定HDL-C与LDL-C的单位已越来越少,许多实验室已改用直接匀相测定法(homogenous method);应用免疫透射比浊法测定apoAI、apoB与Lp(a)中的参数设置与多点定标问题;还应反复强调分析前变异对血脂测定的影响;等等。中华医学会检验分会血脂专家委员会就当前临床血脂测定项目,包括TC、TG、HDL-C、LDL-C、载脂蛋白AI(apoAI)、载脂蛋白B(apoB)、脂蛋白(a)[Lp(a)]的测定方法与临床应用等方面进行了系统讨论与研究,并参考美国国家胆固醇教育计划(NCEP)的有关文件,就临床实验室常规血脂测定提出以下建议,以适应当前我国临床实验室在血脂测定及血脂分析的临床应用等方面工作的需要,进一步推动血脂测定和研究工作的发展与进步。


分析前变异对血脂测定结果的影响

对于血脂测定,应特别要注意分析前变异对实验结果的影响。主要来源于:生物学因素,如个体间、性别、年龄和种族;行为因素,如饮食、肥胖、吸烟、紧张、饮酒、饮咖啡和锻炼等;临床因素,如①疾病继发(内分泌或代谢性疾病、肾脏疾病、肝胆疾病及其它),②药物诱导(抗高血压药,免疫抑制剂及雌激素等);标本收集与处理,如禁食状态、血液浓缩、抗凝剂与防腐剂、毛细血管与静脉血、标本贮存等。
      建议采取一些方法减少血脂和脂蛋白测定分析前因素对结果的影响,如血脂分析前受试者应处于稳定代谢状态,至少2周内保持一般饮食习惯和体重稳定,测定前24h内不应进行剧烈体育运动;如血脂检测异常,在作出医学决定以及进一步处理前,应在两月内进行再次或多次测定,但至少要相隔一周;虽然有人认为TC测定可不用禁食,但应注意饱餐后TC会有所下降;对于TG和其它脂蛋白检测则需至少禁食12h标本;除卧床不起者外,采血时一般取坐位,抽血前受试者至少应坐位休息5min;静脉穿刺过程中止血带使用不应超过1min;血清或血浆标本均适用于血脂、脂蛋白测定,但现在主张一律用血清。如用EDTA作抗凝剂,分离血浆后应马上放在2℃~8℃保存,以防组分必变,测定结果需乘以1.03;血清标本应及时测定,如24h内不能完成测定,可密封置于4℃保存1周,-20℃可保存数月,-70℃至少可保存半年;应避免标本反复冻溶。

血脂测定的方法学

一、测定方法
    1.血清TC测定 化学抽提法—ALBK法为目前国际上通用的参考方法,用于常规测定方法的评价与监控及参考血清的定值。国内由卫生部北京老年医学研究所生化室建立的高效液相色谱(HPLC)法也已推荐作为我国TC测定的参考方法。
    建议酶法作为临床实验室测定血清TC的常规方法。如胆固醇氧化酶-过氧化物酶-4-氧基安替比林和酚法(CHOD-PAP法)。
    2.血清TG测定 目前尚无公认的TG测定的参考方法,甲醇-硅酸-变色酸法被NCEP推荐为TG测定的参考方法。卫生部北京老年医学研究所建立的HPLC测定总甘油和游离甘油的方法拟推荐为我国TG测定的参考方法。中华医学会检验分会曾推荐脂蛋白脂肪酶-甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法(GPO-PAP法)的二步酶法作为血清TG常规测定方法,对此法能否去净游离甘油方面有人提出质疑。
    建议酶法作为临床实验室测定血清TG的常规方法。如甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶-4-氨基替比林和酚法(GPO-PAP法)。血脂专家委员会的大多数委员同意临床常规实验室可采用一步GPO-PAP法,有条件的实验室(如三级以上医院)应考虑开展游离甘油的测定。
    3.血清HDL-C测定 超速离心法为HDL-C测定的参考方法,主要用于校准物靶值的确立和常规方法准确性的鉴定。硫酸葡聚糖-镁沉淀法(DS法)结合ALBK法被美国胆固醇参考方法实验室网络(CRMLN)指定的比较方法(Desingnated Comparison Method,DCM法)。临床测定HDL-C的方法目前已发展到第3代。第1代为化学沉淀法,如1995年中华医学会检验分会曾在国内推荐的磷钨酸镁沉淀法(PTA法),但此类方法多受高TG影响。第2代为磁珠-硫酸葡萄聚糖-镁分离法,国内应用较少。第3代为匀相测定法(homogeneous methods),标本不需预先沉淀处理,可直接用于自动生化分析仪测定。
    建议匀相测定法作为临床实验室测定血清HDL-C的常规方法。此类方法主要是用一些表面活性剂、多聚物或抗体等将非HDL颗粒遮蔽或将非HDL颗粒胆固醇预先反应除去,然后再测定HDL-C。可供选择的方法主要有:选择性抑制法(Polyanion Polymer/detergent HDL-C assay,PPD法),PEG修饰酶法(PEG-modified enzyme HDL-C assay,PEGME法),清除(Clearance method)包括反应促进剂-过氧化物酶清除法(Synthetic polymer/detergent HDL-C assay,SPD法)和过氧化氢酶清除法(Catalase Reagents Corp HDL-C assay,IRC法)和抗体免疫分离法(antibody immunoseparation HDL-C assay,AB法)。
    4.血清LDL-C测定 超速离心法为LDL-C测定的参考方法,主要用于校准物靶值的确立和常规方法准确性的鉴定。目前临床常规实验室直接分离测定LDL-C的方法大致可分为3代。第1代为化学沉淀法,如1995年中华医学会检验学会曾在国内推荐聚乙烯硫酸沉淀法(PVS法)作为LDL-C测定的常规方法。这类方法主要缺点是TG水平较高(>4.52 mmol/L)时,有时因LDL沉淀不完全而使结果偏低。第2代方法有免疫分离法(Immunoseparation Method)和磁珠-肝素分离法两类,国内应用较少。第3代为匀相测定法,标本不需预先沉淀处理,可直接用于自动。

 

来源:河东乙肝研究所   
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